Ingénieur en techniques biologiques (F/H)

Description sommaire du projet  :

L'homme est exposé de manière chronique à une multitude de substances chimiques (également appelées xénobiotiques). Comme certaines d'entre elles peuvent avoir des effets nocifs à long terme, il est essentiel de comprendre les mécanismes qui régissent la reconnaissance, le métabolisme et la détoxification des xénobiotiques afin d'appréhender pleinement leur influence sur notre organisme. Le récepteur des hydrocarbures aryliques (AHR), également connu sous le nom de « récepteur d'exposome », est l'une des principales protéines chimiosensorielles et la cible d'une myriade de polluants, orchestrant leur métabolisme et médiant certains de leurs effets toxiques. En utilisant la cryo-microscopie électronique, nous avons récemment révélé la structure atomique tant attendue de la protéine AHR liée à un ligand. Pour combler les lacunes qui subsistent dans notre compréhension de la régulation de la PA, nous aimerions caractériser structurellement et fonctionnellement les complexes de la PA avec différentes classes de contaminants émergents (CE) et faire la lumière sur les mécanismes qui régulent la translocation nucléaire de la PA, une étape clé dans l'activation du récepteur. Ces travaux nous permettront d'acquérir des connaissances fondamentales sur la procréation assistée et sur la manière dont elle aide notre organisme à faire face aux diverses substances chimiques auxquelles nous sommes exposés au cours de notre vie. En particulier, la combinaison d'études cellulaires fonctionnelles et d'études structurales au niveau atomique fournira une mine d'informations qui aideront à prédire les effets néfastes de différentes CE sur notre corps, fournissant ainsi de nouveaux outils pour une meilleure surveillance des substances constamment introduites dans notre environnement. Elles faciliteront également le développement de substituts chimiques dépourvus de toxicité liée à la procréation assistée.

Mission et Définition des tâches à accomplir :

 – Assurer le clonage de gènes en systèmes bactérien et eucaryote (cellules d’insectes ou de mammifères), la production, la purification, la caractérisation et la cristallisation de protéines recombinantes

– Définir et mettre en place les protocoles expérimentaux en biochimie pour la production de protéines recombinantes et la réalisation des expériences de cristollagénèse

 – Cloner des gènes, mutagenèse dirigée

– Produire et purifier des protéines recombinantes

– Caractériser les échantillons par différentes méthodes biochimiques (électrophorèse, gel natif, western blot) et biophysiques (DLS, ITC, MALS, anisotropie de fluorescence, CD, Thermofluor)

– Réaliser les expériences de cristallogénèse des protéines

– Concevoir les expériences, analyser et présenter les résultats

Description précise de l'évènement ou du résultat objectif déterminant la fin de la relation contractuelle ainsi que les modalités d'évaluation et de contrôle de ce résultat : 

Un rapport scientifique final sera transmis au financeur dans lequel figureront les étapes et les résultats ainsi qu'une conclusion. Les travaux de l'agent seront évalués périodiquement au cours de réunions et de présentations d'équipe.  Des entretiens individuels avec l'agent pourraient avoir lieu pour identifier les obstacles et trouver des solutions.